Некультивированная стромально-сосудистая фракция жировой ткани человека обладает терапевтическим потенциалом при остеоартрите у иммунодефицитных крыс благодаря прямому воздействию трансплантированных M2-макрофагов

Введение: Некультивированная стромально-сосудистая фракция жировой ткани (SVF), состоящая из стромальных клеток жировой ткани (ADSCs), M2-макрофагов (M2Φ) и других клеток, продемонстрировала терапевтический потенциал при остеоартрите (ОА), однако механизмы её терапевтического действия остаются неясными. Поэтому в настоящем исследовании изучали влияние SVF на ОА в ксенотрансплантационной модели у иммунодефицитных крыс с трансплантацией клеток человека.

Методы: Модель ОА у самок иммунодефицитных крыс создавали посредством дестабилизации медиального мениска. Сразу после операции в коленные суставы трансплантировали SVF человека (1 × 10), ADSCs (1 × 10) или фосфатно-солевой буферный раствор в контрольной группе. Через 4 и 8 недель после операции прогрессирование ОА и синовит оценивали макроскопически и гистологически; методом иммуногистохимии определяли экспрессию коллагена II, SOX9, MMP-13, ADAMTS-5, F4/80, CD86 (M1), CD163 (M2) и человеческого ядерного антигена (hNA). В условиях in vitro методом проточной цитометрии из SVF выделяли CD163-положительные клетки, соответствующие M2Φ. Пеллеты хондроцитов (1 × 10) культивировали совместно с SVF (1 × 10), M2Φ (1 × 10) и ADSCs (1 × 10) либо отдельно в контрольной группе; затем сравнивали размер пеллет. Концентрации TGF-β, IL-10 и MMP-13 в культуральной среде определяли методом иммуноферментного анализа.545544

Результаты: По сравнению с контрольной группой и группой ADSCs в группе SVF прогрессирование ОА происходило значительно медленнее, а синовит был менее выраженным; при этом отмечались более высокая экспрессия коллагена II и SOX9, более низкая экспрессия MMP-13 и ADAMTS-5, а также меньшее количество клеток F4/80 и более низкое соотношение M1/M2 в синовиальной оболочке. Только в группе SVF в синовиальной оболочке крыс выявлялись клетки, частично положительные по hNA, CD163 и F4/80. В условиях in vitro группы SVF, M2Φ, ADSCs и контрольная группа соответственно характеризовались увеличением размера пеллет, повышением концентраций TGF-β и IL-10 и снижением концентрации MMP-13.

Выводы: M2Φ в составе трансплантированной SVF непосредственно воздействовали на ткани реципиента, усиливая секрецию факторов роста и цитокинов, защищающих хондроциты, что приводило к частичному улучшению состояния хондроцитов и гомеостаза сустава. Эти результаты указывают на то, что SVF может быть эффективным методом регенеративной терапии ОА, действующим по механизмам, отличным от механизмов ADSCs.