Инсулиноподобный фактор роста 1 и эстроген, полученные из культуры кумулюсных клеток, повышают успешность экстракорпорального оплодотворения у крупного рогатого скота

Введение: Яичники способны продуцировать инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF-1) и эстроген, однако оба этих фактора также могут вырабатываться в монослойной культуре клеток кумулюса оофоруса при добавлении таких прекурсоров, как фетальная телячья сыворотка (FCS) или бычий сывороточный альбумин (BSA).

Цель: Определить биологическую активность IGF-1 и эстрогена, полученных из клеток кумулюса крупного рогатого скота, при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО).

Методы: Клетки кумулюса выделяли из фолликулов яичников диаметром 2–6 мм и культивировали в среде TCM 199 с добавлением 10% FCS и 10% BSA. Концентрации IGF-1, эстрогена и прогестерона определяли с помощью иммунорадиометрического и радиоиммунного анализов. Для снижения концентрации прогестерона в культуре применяли метод связывания с использованием пробирок, покрытых антителами к прогестерону (anti-P4). Культуральную среду использовали как добавку при ЭКО и для культивирования эмбрионов. Митогенные и антиапоптотические свойства IGF-1 и эстрогена оценивали по снижению частоты апоптоза эмбрионов. Максимальную конфлюэнтность клеточного монослоя наблюдали на 6-е сутки культивирования.

Результаты: Anti-P4 эффективно снижал концентрацию прогестерона в культуре клеток кумулюса. Доля дробящихся эмбрионов при абсорбции прогестерона и без неё составляла соответственно 27,48 и 53,61%, тогда как доля эмбрионов на стадии морулы увеличивалась с 5,73 до 27,59%. Кроме того, добавление культуральной среды снижало частоту апоптоза с 70,58 до 31,01%.

Выводы: Монослойная культура клеток кумулюса крупного рогатого скота продуцировала IGF-1 и эстроген, которые действовали как митогенные факторы, улучшали результаты ЭКО и развитие эмбрионов, а также значительно снижали частоту апоптоза эмбрионов.