Две составные гетерозиготные (вероятно) патогенные варианты MEIOSIN вызывают женское бесплодие с преждевременной недостаточностью яичников за счет нарушения транскрипции генов, связанных с мейозом

Введение: Преждевременная недостаточность яичников (ПНЯ) — одна из основных причин женского бесплодия, однако ее генетическая основа остается недостаточно изученной. MEIOSIN имеет ключевое значение для запуска мейоза, активируя ряд ключевых мейотических генов, которые регулируют переход от митоза к мейозу в половых клетках млекопитающих. Недавние исследования указывают, что двуаллельные варианты MEIOSIN могут быть связаны с ПНЯ у человека, однако для подтверждения и уточнения этой роли требуются дополнительные данные.

Методы: Для выявления потенциально патогенных вариантов, ассоциированных с ПНЯ, у пораженных пациенток выполнили полноэкзомное секвенирование с последующим подтверждением вариантов методом секвенирования по Сэнгеру. Для оценки функциональных последствий этих вариантов провели серию исследований in vitro, включая вестерн-блоттинг, иммунное окрашивание и структурное моделирование мутантных белков. Кроме того, использовали двулюциферазный репортерный анализ, чтобы оценить, влияют ли выявленные варианты на транскрипционную активность MEIOSIN.

Результаты: У двух пораженных сестер выявили два составных гетерозиготных варианта в MEIOSIN — c.980T>C (p.Leu327Pro) и c.1068_1092del (p.His356fs*14), причем последний был новым вариантом. Секвенирование по Сэнгеру подтвердило, что оба варианта унаследованы от разных родителей, что указывает на составную гетерозиготность. Функциональная характеристика показала, что вариант со сдвигом рамки считывания приводил к укороченному белку MEIOSIN с аномальной внутриклеточной локализацией. Хотя миссенс-вариант не влиял на экспрессию или локализацию MEIOSIN, он нарушал трехмерную структуру белка. Кроме того, двулюциферазные тесты показали, что оба варианта нарушали транскрипционную регуляцию MEIOSIN нижележащих мейотических генов. Согласно рекомендациям ACMG/AMP, вариант со сдвигом рамки считывания был классифицирован как патогенный, а миссенс-вариант — как вероятно патогенный.

Выводы: Эти данные убедительно свидетельствуют о том, что патогенные двуаллельные варианты в MEIOSIN представляют собой повторяющуюся генетическую причину ПНЯ у человека.