Оценка условий дифференцировки без сыворотки для миобластов C2C12 по способности к генерации активного напряжения

Сопоставлены несколько бессывороточных сред для дифференцировки миобластов C2C12 и оценена степень дифференцировки по ряду показателей, включая способность к генерации активного напряжения. Клетки C2C12 дифференцировали в среде Дульбекко, модифицированной по Иглу, содержащей Ham's F-12 (F-12), AIM-V (AIM), 0,2% Ultroser-G в среде Дульбекко, модифицированной по Иглу (Ult-G), и 0,1% серицена в среде Дульбекко, модифицированной по Иглу (Sericin), в сравнении со средой Дульбекко, модифицированной по Иглу, с добавлением 2% лошадиной сыворотки (HS) или 2% телячьей сыворотки (CS). Дифференцировку C2C12 оценивали по образованию миотуб, метаболизму глюкозы, экспрессии белков, формированию саркомеров и генерации активного напряжения. Все исследованные бессывороточные среды были способны индуцировать образование миотуб и экспрессию мышечно-специфических белков. Все бессывороточные среды, кроме F-12, обеспечивали формирование саркомерной структуры. Генерация активного напряжения наблюдалась у клеток, дифференцированных в AIM и Ult-G, однако при дифференцировке в Ult-G активное напряжение составляло лишь примерно 25% от такового у миотуб, сформированных в HS. Добавление Ult-G к AIM улучшало способность к генерации активного напряжения: оно возрастало примерно в 3,4 раза по сравнению с HS. Подход к оценке дифференцировки мышечных клеток, предложенный в этом исследовании, пригоден и для других работ, связанных с дифференцировкой мышечных клеток.