Витамин C необходим для правильной миогенной дифференцировки

Введение: Витамин C (VC) естественно присутствует в крови и скелетных мышцах. Однако стандартные питательные среды для культивирования миобластов обычно не содержат VC. Поскольку VC имеется в скелетной мышце, среды с добавлением VC должны лучше отражать физиологические условия, чем среды без VC. Поэтому мы использовали среду с добавлением VC, чтобы изучить влияние дефицита VC на миогенную дифференцировку.

Методы: Миобласты мыши C2C12 культивировали в дифференцировочной среде с добавлением VC или без VC, при этом среду заменяли каждые 24 часа для сохранения активности VC.

Результаты: Сначала мы подтвердили, что VC надежно захватывается клетками C2C12. Мы оценивали экспрессию регуляторных факторов мышечной дифференцировки. Уровень экспрессии поздних маркеров дифференцировки, включая миогенин (MyoG), myomaker (Mymk), тяжелую цепь миозина 1 (Myh1) и Myh4, в ранние сроки миогенной дифференцировки был повышен в среде без VC. Напротив, уровни экспрессии терминальных миогенных маркеров в зрелых миофибриллах, таких как тропонин I медленных скелетных мышц (Tnni1) и тропонин I быстрых скелетных мышц (Tnni2), увеличивались в клетках, дифференцированных в среде без VC, но были ниже, чем в клетках, дифференцированных в среде с добавлением VC. Диаметр дифференцированных миотуб был меньше в среде без VC, чем в среде с VC. Уровень 5-гидроксиметилцитозина (5-hmC), продукта VC-зависимого фермента деметилирования ДНК ten-eleven translocation (Tet), был значительно ниже в среде без VC.

Выводы: Полученные результаты указывают на то, что VC модулирует миогенную дифференцировку.