Кауреновая кислота активирует сигнальный путь TGF-β

Введение: Кауреновая кислота (ent-kaur-16-en-19-oic acid; KA) — важный компонент корней аралии континентальной Китагавы (Aralia continentalis Kitagawa, Araliaceae), которые традиционно применяют в азиатской медицине для лечения ревматизма.

Гипотеза: Хотя было показано, что KA подавляет воспаление посредством активации Nrf2, её противовоспалительное действие изучено недостаточно. Учитывая сложный характер воспалительного ответа и ключевую роль TGF-β в разрешении воспаления, мы предположили, что KA подавляет воспалительный ответ, активируя сигнальный путь TGF-β.

Методы: Макрофаги мыши RAW 264.7, клетки эпителия лёгких человека MRC-5 и клетки HCT116 с дефектом TGFβRII обрабатывали различными концентрациями KA. KA также вводили в лёгкие мышей интратрахеально. Фосфорилирование Smad2 и Smad3 оценивали методом вестерн-блоттинга. Экспрессию генов, зависимую от TGFβ, определяли с помощью иммуноблоттинга α-гладкомышечного актина (α-SMA) и люциферазного анализа.

Результаты: KA индуцировала фосфорилирование Smad2 и Smad3 — ключевых активирующих молекул сигнального пути TGF-β. EW7197, ингибитор активин-рецептороподобной киназы 5/рецептора TGF-β I типа (TGFβR1), подавлял фосфорилирование Smad2, опосредованное KA. Аналогично, KA не вызывала фосфорилирование Smad2 в клетках HCT116, что указывает на действие KA через канонический рецептор TGFβ. В люциферазном анализе KA повышала транскрипционную активность, обусловленную Smad-связывающим элементом, и индуцировала экспрессию α-гладкомышечного актина (α-SMA). Аналогично, интратрахеальное введение KA вызывало фосфорилирование Smad2 и повышало экспрессию α-SMA в лёгких мышей.

Выводы: KA активировала сигнальный путь TGF-β, что указывает на связь между активацией TGFβ и подавлением воспаления под действием KA.