Воспалительные цитокины TNFα, IL-1β и IL-6 индуцируются в микроглии, стимулированной эндотоксином, посредством различных сигнальных каскадов

С использованием модели, в которой воспалительные цитокины индуцируются в головном мозге крыс после введения липополисахарида (LPS), мы изучили индукцию фактора некроза опухоли α (TNFα), интерлейкина-1β (IL-1β) и интерлейкина-6 (IL-6). Иммуноблоттинг и иммуногистохимическое исследование показали, что все три цитокина транзиторно индуцировались в коре головного мозга примерно через 12 ч после введения LPS. Чтобы определить, какой тип глиальных клеток индуцирует эти цитокины, мы исследовали соответствующие способности астроцитов и микроглии. Первичная культура микроглии в ответ на LPS активно индуцировала TNFα, IL-1β и IL-6, тогда как первичная культура астроцитов индуцировала лишь небольшое количество TNFα. Поэтому для изучения сигнальных молекул, участвующих в индукции TNFα, IL-1β и IL-6, мы сосредоточились на микроглии и использовали специфические ингибиторы. Эксперименты с ингибиторами митоген-активируемых протеинкиназ (MAPK) показали, что для индукции TNFα, IL-1β и IL-6 необходимы соответственно каскады c-Jun N-концевой киназы (JNK)/p38, внеклеточно-регулируемой киназы (ERK)/JNK и ERK/JNK/p38. Эксперименты с ингибитором протеинкиназы C (PKC) показали, что PKCα необходима для индукции всех этих цитокинов в микроглии, стимулированной LPS. Кроме того, индукция IL-1β и IL-6 под действием LPS подавлялась после предварительной обработки поглотителем оксида азота (NO), что указывает на участие NO в сигнальном каскаде индукции IL-1β и IL-6. Таким образом, индуцируемая NO-синтаза, экспрессия которой повышается в коре головного мозга после введения LPS, может быть связана с индукцией IL-1β и IL-6 посредством образования NO. В совокупности эти результаты показали, что микроглия индуцирует различные воспалительные цитокины посредством специфических комбинаций MAPK, определяемых наличием или отсутствием NO, как in vitro, так и in vivo.