Валидация анализа крови на основе 2 генов для диагностики болезни Кавасаки у лихорадящих детей

Важность: Болезнь Кавасаки (БК) по-прежнему остается клиническим диагнозом без объективного молекулярного теста. Раннее выявление имеет решающее значение для профилактики коронарных осложнений при своевременной терапии внутривенным иммуноглобулином.

Цель: Валидировать двухгенный количественный полимеразно-цепной реактивный анализ цельной крови с определением экспрессии IFI27 и MCEMP1 для дифференциации БК от других лихорадочных заболеваний у детей.

Дизайн, условия и участники: Многоцентровое диагностическое исследование проведено в Тайване и Шанхае, Китай. Образцы крови пациентов проспективно собирали в 2012–2023 годах в Тайване и в 2022–2023 годах в Шанхае; ретроспективно анализировали данные детей младше 8 лет с БК и лихорадочных контролей с вирусными, бактериальными или смешанными инфекциями. Анализ данных проводили с января 2022 года по август 2025 года.

Основные исходы и методы: Диагностическая точность заранее определенного двухгенного индекса БК, полученного на основе изменений пороговых циклов после нормализации по глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназе; оценивали площадь под ROC-кривой (AUC), чувствительность, специфичность, прогностические значения и отношения правдоподобия.

Результаты: В анализ включили 541 ребенка (средний [SD] возраст 3,7 [1,9] года; 300 [55,5%] мальчиков), в том числе 243 ребенка с БК и 298 лихорадочных контролей. Индекс БК достиг AUC 0,91 (95% ДИ 0,88–0,94), чувствительности 94% (95% ДИ 93%–97%) и специфичности 82% (95% ДИ 78%–86%). Положительное отношение правдоподобия составило 5,12, отрицательное — 0,05. Показатели были сопоставимы в разных когортах, включая неполную БК, разнообразные причины лихорадки у контролей и разные коронарные фенотипы. Анализ был внедрен как лабораторно разработанный тест. Аналитическая валидация показала высокую линейность (R2 > 0,99), прецизионность (коэффициент вариации <5%) и стабильность образцов до 6 дней при 4 °C или 24 часа при комнатной температуре.

Выводы и значимость: В этом диагностическом исследовании двухгенный лабораторно разработанный анализ цельной крови с qPCR, измеряющий экспрессию IFI27 и MCEMP1, точно отличал БК от других лихорадочных заболеваний с использованием стандартных молекулярных платформ. Необходима проспективная оценка в более широких популяциях, чтобы определить его клиническую ценность для сокращения диагностической задержки и коронарных осложнений.