Криоконсервация ооцитов, эмбрионов и бластоцист в программах ВРТ: систематический обзор и метаанализ сравнения медленного замораживания и витрификации для разработки глобальных рекомендаций

Введение: Успешная криоконсервация ооцитов и эмбрионов необходима не только для повышения безопасности и эффективности циклов стимуляции яичников при лечении методом экстракорпорального оплодотворения, но и для сохранения фертильности. В настоящее время рутинно применяют два метода криоконсервации: медленное замораживание и витрификацию. При медленном замораживании охлаждение происходит с достаточно низкой скоростью, что обеспечивает адекватную дегидратацию клеток и одновременно минимизирует образование внутриклеточного льда. При витрификации клетки и внеклеточная среда переходят в стеклообразное состояние без образования льда.

Цель: Провести систематический обзор и метаанализ клинических исходов после медленного замораживания с последующим оттаиванием и после витрификации с последующим отогреванием ооцитов и эмбрионов, а также использовать полученные данные для разработки рекомендаций Всемирной организации здравоохранения по наиболее эффективному методу криоконсервации.

Методы: Поиск в базе Medline проводили с 1966 года по 1 августа 2016 года по следующим поисковым терминам: (Oocyte(s) [tiab] OR (Pronuclear[tiab] OR Embryo[tiab] OR Blastocyst[tiab]) AND (vitrification[tiab] OR freezing[tiab] OR freeze[tiab]) AND (pregnancy[tiab] OR birth[tiab] OR clinical[tiab]). Поиск ограничивали исследованиями с участием человека. К рассмотрению допускали полнотекстовые рандомизированные контролируемые исследования и когортные исследования. Все найденные публикации оценивали на соответствие теме; учитывали только первичные данные и релевантные статьи из списков литературы включённых публикаций. В обзор включали исследования, в которых сообщались показатели выживаемости после криоконсервации, частота клинической беременности, частота живорождений или частота родов после медленного замораживания либо витрификации ооцитов или эмбрионов человека. Метаанализ выполняли с использованием модели случайных эффектов; рассчитывали отношения рисков (RR) и 95% доверительные интервалы (ДИ).

Результаты: В анализ включили одно рандомизированное контролируемое исследование, сравнивавшее медленное замораживание и витрификацию ооцитов. Витрификация была связана с более высокой частотой продолжающейся клинической беременности на цикл (RR = 2,81; 95% ДИ 1,05–7,51; P = 0,039; 48 и 30 циклов соответственно), на перенос (RR = 1,81; 95% ДИ 0,71–4,67; P = 0,214; 47 и 19 переносов) и на отогретый или размороженный ооцит (RR = 1,14; 95% ДИ 1,02–1,28; P = 0,018; 260 и 238 ооцитов). Было проанализировано одно рандомизированное контролируемое исследование, сравнивавшее витрификацию и использование свежих ооцитов. При использовании витрифицированных и свежих ооцитов соответственно не выявлено различий в частоте продолжающейся клинической беременности в расчёте на рандомизированную женщину (RR = 1,03; 95% ДИ 0,87–1,21; P = 0,744; по 300 женщин в каждой группе), на цикл (RR = 1,01; 95% ДИ 0,86–1,18; P = 0,934; 267 и 259 циклов) и на использованный ооцит (RR = 1,02; 95% ДИ 0,82–1,26; P = 0,873; 3286 и 3185 ооцитов). Эти результаты соответствовали данным релевантных когортных исследований.

Из семи выявленных рандомизированных контролируемых исследований по криоконсервации эмбрионов критериям включения соответствовали три; в них было проведено 638 циклов отогревания или размораживания эмбрионов на стадии дробления и стадии бластоцисты. Ни одно из этих исследований не включало эмбрионы на пронуклеарной стадии. При витрификации эмбрионов частота клинической беременности на цикл была выше, чем при медленном замораживании, однако статистическая значимость этого различия была пограничной (RR = 1,89; 95% ДИ 1,00–3,59; P = 0,051; три рандомизированных контролируемых исследования; I² = 71,9%). Частота живорождений на цикл оценивалась в одном рандомизированном контролируемом исследовании с эмбрионами на стадии дробления и была выше после витрификации (RR = 2,28; 95% ДИ 1,17–4,44; P = 0,016; 216 циклов; одно рандомизированное контролируемое исследование). Дополнительно проанализировали выживаемость эмбрионов после криоконсервации. Объединённые данные семи рандомизированных контролируемых исследований (3615 эмбрионов) показали значимое повышение выживаемости эмбрионов после витрификации по сравнению с медленным замораживанием (RR = 1,59; 95% ДИ 1,30–1,93; P < 0,001; I² = 93%).

Значимость: Данные доступных рандомизированных контролируемых исследований свидетельствуют о превосходстве витрификации с последующим отогреванием над медленным замораживанием с последующим оттаиванием по клиническим исходам (доказательность низкая) и показателям выживаемости после криоконсервации (доказательность умеренная) для ооцитов, эмбрионов на стадии дробления и бластоцист. Результаты подтверждены когортными исследованиями. Улучшение результатов после внедрения витрификации имеет несколько важных клинических последствий для ВРТ. С учётом этих данных, особенно более высокой выживаемости после криоконсервации, лабораториям, продолжающим применять медленное замораживание, следует рассмотреть переход на витрификацию.