Влияние фрагментации ДНК сперматозоидов на развитие эмбриона: клинические и биологические аспекты

Цель: изучить влияние фрагментации ДНК сперматозоидов на частоту оплодотворения, развитие эмбриона (частоту бластоцистообразования) и исходы беременности в циклах ИКСИ в когорте супружеских пар с использованием донорских ооцитов, а также оценить эмбрионы, не перенесённые и не подвергшиеся криоконсервации, на наличие маркеров апоптоза.

Методы: В исследование были включены 82 женщины-реципиентки ооцитов. Средний возраст реципиенток составил 41,8±5,1 года (36-49), а доноров ооцитов — 30,8±2,1 года (27-33). Хотя в нашем центре циклы с донорскими ооцитами и замороженными образцами спермы выполняются регулярно, 35 циклов были проведены с использованием свежих образцов спермы. Средний возраст мужчин, участвовавших в процедуре, составил 40,1±5,2 года. Оценивали частоту оплодотворения, бластоцистообразования и наступления беременности. Пациентов разделили на две группы: TUNEL <15% и ≥15%. В остановившихся в развитии эмбрионах с помощью иммуноцитохимии определяли cleaved caspase-3, survivin, TUNEL и ДНК. Для межгрупповых сравнений использовали t-критерий Стьюдента. Для оценки однородности применяли U-критерий Манна—Уитни. Также рассчитывали коэффициент корреляции Пирсона. Статистически значимыми считали различия при p<0,05.

Результаты: Показана отрицательная корреляция (R=-0,5) между фрагментацией ДНК и частотой бластоцистообразования. Высокий уровень фрагментации ДНК был связан с более низкими частотой бластоцистообразования и частотой наступления беременности (на перенос), тогда как частота оплодотворения не страдала. Образцы с более высоким уровнем фрагментации ДНК были связаны с более высоким уровнем фрагментации ДНК в бластомерах без активации апоптотического пути (9,1% против 15,9%) (p<0,05). В бластомерах из образцов с высокой фрагментацией ДНК апоптотический путь активировался чаще, чем в образцах с TUNEL <15% (16,4% против 21,9%) (p<0,05).

Выводы: Фрагментация ДНК сперматозоидов отрицательно коррелировала с частотой бластоцистообразования и наступления беременности даже при хорошем качестве ооцитов. Высокий уровень повреждения ДНК способствует остановке развития эмбриона и активации апоптотического пути.