Разработка метода редактирования генома для восстановления зрения при врождённом амаврозе Лебера 10-го типа

Врождённый амавроз Лебера 10-го типа — тяжёлая дистрофия сетчатки, обусловленная мутациями гена CEP290. Мы разработали EDIT-101 — кандидатный препарат для редактирования генома, предназначенный для удаления аномального донорного сайта сплайсинга, образующегося из-за мутации IVS26 в гене CEP290, и восстановления нормальной экспрессии CEP290. Для этого препарата были подобраны две направляющие РНК Cas9 из Staphylococcus aureus, обладающие высокой активностью и специфичностью в отношении целевой последовательности CEP290 человека. Эксперименты in vitro на клетках человека и эксплантатах сетчатки подтвердили молекулярный механизм действия и специфичность нуклеазы. Субретинальное введение EDIT-101 мышам с гуманизированным геном CEP290 обеспечило быстрое и стойкое редактирование этого гена. Вектор-аналог, разработанный для приматов, кроме человека, также обеспечил редактирование гена CEP290 у этих животных на уровне, соответствующем целевому терапевтическому порогу, и продемонстрировал возможность редактирования соматических клеток приматов с помощью CRISPR/Cas9 in vivo. Эти результаты обосновывают дальнейшую разработку EDIT-101 для лечения врождённого амавроза Лебера 10-го типа, а также создание других препаратов на основе CRISPR для лечения наследственных заболеваний сетчатки.1,2