Определение мутационной нагрузки KIT p.D816V методом SuperRCA выявляет новую связь с клиническим фенотипом

Введение: Мутация p.D816V выявляется более чем у 90% пациентов с системным мастоцитозом (СМ). Высокая доля мутантного аллеля (VAF) связана с неблагоприятным исходом, однако до настоящего времени связь между мутационной нагрузкой и клиническими симптомами не была установлена.

Цель: Количественно определить VAF мутации p.D816V в крови и костном мозге (КМ) с помощью ультрачувствительного метода SuperRCA и сопоставить полученные значения с клиническими симптомами.

Методы: Проанализировано 107 образцов крови и костного мозга пациентов с СМ.

Результаты: В 78 из 107 образцов для достижения чувствительности выявления мутации p.D816V на уровне 0,0016% VAF использовали 660 нг ДНК. При парном анализе VAF мутации p.D816V была значительно выше в костном мозге, чем в крови, и коррелировала с бременем заболевания при СМ — уровнем триптазы в сыворотке и долей инфильтрации костного мозга тучными клетками. Связи между VAF и анафилаксией, остеопорозом или желудочно-кишечными симптомами не выявлено. Среди пациентов с индолентным системным мастоцитозом (ISM) при наличии кожного поражения VAF в крови была выше, несмотря на сходную долю инфильтрации костного мозга тучными клетками.

Выводы: Применение SuperRCA для выявления p.D816V показало, что у пациентов с ISM VAF в крови выше при наличии кожного мастоцитоза, чем при отсутствии кожного поражения. Это позволяет предположить, что циркулирующие клетки-предшественники с потенциалом дифференцировки в тучные клетки могут определять кожный фенотип. Кроме того, результаты парного анализа образцов крови и костного мозга подтверждают данные предыдущих исследований и свидетельствуют о более высокой VAF в костном мозге по сравнению с кровью, а также о корреляции VAF с бременем заболевания.