Вирусная нагрузка, определяемая по мазку, как биомаркер биологии опухоли при ассоциированном с ВПЧ плоскоклеточном раке ротоглотки

Введение: Точная локализация плоскоклеточного рака ротоглотки, индуцированного вирусом папилломы человека (ВПЧ+ РРГ), по-прежнему представляет собой серьезную диагностическую проблему. Мы разработали направленный на конкретный участок слизистой мазковый тест, предназначенный для выявления и количественной оценки ДНК ВПЧ, выделяющейся из опухоли на поверхность ротоглотки над опухолями, ассоциированными с ВПЧ.

Методы: После получения информированного согласия в исследование включали пациентов с ВПЧ+ РРГ, подтвержденным биопсией, или плоскоклеточным раком полости рта в качестве контроля. Забирали мазки с участка опухоли, а также с нормальной слизистой на противоположной стороне. ДНК из мазков выделяли и анализировали методом количественной полимеразной цепной реакции с нацеливанием на ВПЧ16 и типированием ВПЧ методом секвенирования по Сэнгеру. Для оценки связи между вирусной нагрузкой, определяемой по мазку, и клинико-патологическими характеристиками использовали многомерные линейные регрессионные модели.

Результаты: В проспективной когорте из 30 пациентов с ВПЧ+ РРГ мазки, взятые со стороны опухоли, выявили ДНК ВПЧ в 30 из 30 случаев. В мазках, полученных со слизистой на противоположной стороне, уровни ДНК ВПЧ были существенно ниже, что свидетельствует о высокой пространственной специфичности для опухоленесущего участка. Предел обнаружения теста составил примерно 10 копий ВПЧ16 на реакцию (1 вирусный геном на 500 диплоидных клеток). У всех пациентов контрольной группы с плоскоклеточным раком полости рта результаты были отрицательными. Регрессионные модели показали, что наличие метастатического поражения лимфатических узлов независимо связано с низкой количественной вирусной нагрузкой ВПЧ16 (коэффициент изменения 0,013; 95% ДИ 0,001–0,178).

Выводы: Этот мазковый тест обеспечивает малоинвазивное анатомически направленное выявление ВПЧ-ассоциированного рака в первичном очаге и может сократить диагностический путь при ВПЧ+ РРГ, одновременно давая количественную оценку вирусной нагрузки, которая может служить суррогатным биомаркером внутритуморной биологии при ВПЧ+ РРГ.